ALERGIJOS EKSPERTAS
  • Tinklarastis
  • Apie
  • Alergijos ABC
  • alergo.lt
  • Klauskite

Prof. Rūta Dubakienė

Specifinių IgE antikūnų nustatymas

21/12/2017

 

.
Dabar naudojama daugybė kitų imunologinių metodų, nustatančių IgE, pavyzdžiui, Pharmacia CAP sistema, MAST‘o sistema, RAPID metodas.
       UniCAP 100 prietaisu (Pharmacia & Upjohn Diagnostics AB, Upsala, Švedija) tyrimas atliekamas per 2,5 val. Tai greita, visiškai integruota ir automatizuota fluorimunofermentinės analizės in vitro sistema (CAP). Reakcija vyksta mažose „kepurėlėse“ (ImmunoCAP), prie kurių kovalentiškai prijungiami pelės monokloniniai antikūnai prieš žmogaus bendrąjį IgE (arba sIgE ar ECP). Sudėjus pavyzdžius, standartinius ir kontrolinius tirpalus, inkubuojama. Inkubacijos metu vyksta antigeno ir antikūno reakcija. Atlikus plovimo procedūrą, sulašinami fermentu (β-galaktozidaze) žymėti pelės monokloniniai anti-IgE (arba anti-sIgE ar anti-ECP) antikūnai. Po inkubacijos ir plovimo „išryškinama“: inkubuojama su „išryškinamuoju“ tirpalu (development solution) – 0,01% 4-metilbelliferil-β-D-galaktozidaze ir 0,05% ketonu CG. Sustabdžius reakciją 4% natrio karbonatu, matuojama tirpalo fluorescencija. Ji tiesiog proporcinga serumo pavyzdžių IgE (arba sIgE ar ECP) koncentracijai. IgE matavimo ribos, naudojant UniCAP sistemą, yra 2-5000 kU/l; sIgE – 0,35-100 kU/l; ECP – 2-200 μg/l.
        Tai – dvipakopė imuninė reakcija.
        I pakopa.:
        1) antigenas jungiamas su kietąja faze (imunosorbentu);
        2) kietoji fazė inkubuojama su ligonio serumu;
        3) IgE molekulės, specifiškos antigenui, jungiasi prie kietosios fazės;
        4) nesusijungę IgE išplaunami (pašalinami išplaunant).
        II pakopa:
     5) ir 6) į serumą pridedama pažymėto anti-IgE;
     7) jis konkuruoja su sujungtu IgE;
     8) po to, kai nesujungtas anti-IgE nuplaunamas, matuojamas kietosios fazės radioaktyvumas ar fluorescencija ir jis naudojamas matuoti IgE koncentracijai ligonio serume.

    Picture

    Autorė

    ​Prof. R. Dubakienė - aukščiausios kategorijos gydytoja alergologė ir klinikinė imunologė, Vilniaus universiteto Medicinos fakulteto profesorė, habilituota medicinos daktarė, turinti 40 metų stažą alergologijoje.

    Archyvas

    October 2020
    September 2020
    July 2020
    June 2020
    May 2020
    April 2020
    March 2020
    February 2020
    January 2020
    December 2019
    November 2019
    October 2019
    May 2019
    April 2019
    March 2019
    February 2019
    January 2019
    December 2018
    November 2018
    October 2018
    September 2018
    August 2018
    July 2018
    June 2018
    May 2018
    April 2018
    March 2018
    February 2018
    January 2018
    December 2017
    November 2017
    October 2017
    September 2017
    August 2017
    July 2017
    June 2017
    May 2017
    April 2017
    March 2017
    February 2017
    January 2017
    December 2016
    November 2016
    October 2016

    Kategorijos

    All
    Alergija

    RSS Feed

Copyright © 2016-2018 Rūta Dubakienė
Powered by Create your own unique website with customizable templates.
  • Tinklarastis
  • Apie
  • Alergijos ABC
  • alergo.lt
  • Klauskite